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人臍靜脈內皮細胞的細胞接種培養

日期:2022-05-19 18:04
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摘要:
 
人臍靜脈內皮細胞在進行血管內皮細胞實驗時,通常選用的細胞模型為人臍靜脈內皮細胞(Human umbilical vein endothelial cells,簡稱HUVECs)。而不是直接采用靜脈血管內皮細胞或動脈血管內皮細胞。原因是臍靜脈內皮細胞具有幹細胞的潛能,理論上可以傳代50-60次。
1、細胞接種:
(1)、包被液:用去離水配製0.5%明膠溶液,過濾除菌。
(2)、培養瓶包被:取2-4個T25培養瓶,每個培養瓶加2-3ml0.5%明膠溶液,搖勻使包被液布滿培養瓶底麵,置37℃2小時或放置過夜。
(3)、接種細胞:接種前吸淨包被液,按2500-5000個細胞/cm接種細胞(1支5×10個細胞可接種2-4個培養瓶),每瓶加培養液3-5ml,搖勻後置37℃5%CO2培養箱內培養24小時,此時細胞已完全貼壁,更換培養液後繼續在37℃5%CO2培養箱內培養。
(4)、擴大培養:一般每周更換培養液2次,至細胞長至覆蓋培養麵的70-80%可進行傳代或凍存。




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